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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
蛋白酶抑制劑混合物片劑 |
1片/10片/20片 |
|
蛋白 |
-20℃保存 |
BH-D85406 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝谷胱甘肽還原酶(GSH-PX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
糖蛋白130 48T/96T
腎素 48T/96T
人利鉀尿肽(KP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人γ肽(Pγ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰高血糖素樣肽-2 48T/96T
雞環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蛋白酶抑制劑混合物片劑人胸腺肽α1 規(guī)格: 48T Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit
人球蛋白重鏈 規(guī)格: 48T IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit
人纖溶酶抗纖溶酶復合物 規(guī)格: 48T Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit
人胰高血糖素 規(guī)格: 48T Human Glucagon,GC ELISA Kit
人TU3A蛋白 規(guī)格: 48T Human TU3A Protein ELISA Kit
人cAMP反應元件結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit
人甘油三酯 規(guī)格: 48T TG ELISA Kit(human)
人轉(zhuǎn)錄因子Tbx3 ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T Human T-box protein 3 ELISA Kit(human)
大鼠胰島素自身抗體 規(guī)格: 48T IAA ELISA Kit
大鼠組織蛋白酶K 規(guī)格: 48T cath-K ELISA Kit
大鼠B瘤因子2 規(guī)格: 48T Bcl-2 ELISA Kit
LB固體培養(yǎng)基(干粉) 1L 瓶
兔抗人IgG(血清) 5ml 支
Agarose L.M.P 低溶點瓊脂糖 5g 瓶
膜再生液 100ml 瓶
25cm2正方斜口透氣培養(yǎng)瓶 20個 包
Hoechst 33258染色液(即用型) 50ml 瓶
Shanzhiside methylester 山梔苷甲酯 64421-28-9 20mg
Lappaconitine Hydrobromide 氫溴酸高烏甲素 97792-45-5 20mg
Denudatine 光翠雀堿 26166-37-0 20mg
Artesunate 琥酯 88495-63-0 20mg