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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大鼠血管平滑肌細胞;USMC

  • 產(chǎn)品型號:P-X10966
  • 產(chǎn)品廠商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
大鼠血管平滑肌細胞;USMC公司正在出售的產(chǎn)品:SVEC4-10小鼠結(jié)血管上皮樣細胞貼壁生長上皮細胞樣SVEC4-10:SVEC410小鼠細胞系組織來源:腋窩結(jié)人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒組織CaM KII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
詳情介紹:

大鼠血管平滑肌細胞;USMC

英文名稱

USMC

產(chǎn)品形態(tài)

成纖維細胞樣 貼壁細胞

貨號

P-X10966

產(chǎn)品分類

大鼠細胞系

規(guī)格

1×106

包裝

來源

說明書

用途

僅供科研研究使用

細胞特性:

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM10% FBS1% P/S

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

推薦換液頻率 2~3/

細胞類型 正常細胞

 

運輸和保存:

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有 1 mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓毎麘乙杭尤?6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細胞僅供科研使用。 
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。 
9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

FRMD6蛋白抗體 FRMD6

糖原蛋白1抗體 GYG1

G氨基丁酸A型受體rho1/GABAA Rρ1抗體 GABRR1

4號染色體開放閱讀框22抗體 C4orf22

膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體 NOD26/NLRX1

RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 RPUSD2

腦磺基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白4A1抗體 SULT4A1

Ras蛋白特異鳥嘌呤核苷酸釋放因子3抗體 RASGRP3

7號染色體開放閱讀框72抗體 C7orf72

透明帶黏附蛋白ZAN抗體 ZAN

激肽釋放酶抑制劑抗體 KLST/Kallistatin

乙肝病毒衣殼蛋白抗體 HBcAg

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體 FOXE1

動力蛋白激活蛋白亞基3抗體 DCTN3

氧化低密度脂蛋白單克隆抗體 ox-LDL

耳蝸蛋白OTOS抗體 OTOS

大鼠Podocin蛋白(PDCN)elisa檢測試劑盒

FKBP135蛋白抗體 FKBP135

小鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)elisa檢測試劑盒

GDP甘露糖焦磷酸化酶B抗體 GMPPB

大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)elisa分析檢測試劑盒

錨蛋白重復(fù)域54抗體 ANKRD54

組織5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測試劑盒

腦啡肽受體/ζ受體抗體 Zeta Opioid Receptor

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)elisa檢測試劑盒

NE高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒

大鼠絡(luò)絲蛋白(RL)elisa檢測試劑盒

大鼠血管平滑肌細胞;USMC土壤速效氮測試盒

人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)elisa分析檢測試劑盒

小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)elisa檢測試劑盒

組織樣品組織BCATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒

大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)elisa檢測試劑盒


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