主營產(chǎn)品:
生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,PCR試劑盒,?核酸檢測(cè)試劑盒,熒光定量檢測(cè)試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測(cè)試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免yi檢測(cè)試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
咨詢電話:18117197628
新聞詳情
WB封閉液的選用要求
日期:2024-10-08 15:28
瀏覽次數(shù):433
摘要:
封閉是Western Blot 至關(guān)重要的一部分, 所以正確的封閉液選擇可以讓抗體更特異地和抗原結(jié)合,為成功的WB奠定基礎(chǔ)。封閉液的選用要求:
1、常用封閉液為脫脂牛奶(光明或伊利等)、牛血清白蛋白(BSA)、無蛋白封閉液等。
2、封閉液濃度:封閉時(shí)一般用5%脫脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%無蛋白封閉液;配制二抗稀釋液一般為1-5%脫脂牛奶,全部用PBS稀釋。
3、封閉時(shí)間:室溫1-2h、4度過夜或37度半小時(shí)。
4、封閉液pH:一般5%脫脂牛奶pH大約為6.0-6.5左右,而1%脫脂牛奶可能6.5-7,好像RD公司的W...
封閉是Western Blot 至關(guān)重要的一部分, 所以正確的封閉液選擇可以讓抗體更特異地和抗原結(jié)合,為成功的WB奠定基礎(chǔ)。封閉液的選用要求:
1、常用封閉液為脫脂牛奶(光明或伊利等)、牛血清白蛋白(BSA)、無蛋白封閉液等。
2、封閉液濃度:封閉時(shí)一般用5%脫脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%無蛋白封閉液;配制二抗稀釋液一般為1-5%脫脂牛奶,全部用PBS稀釋。
3、封閉時(shí)間:室溫1-2h、4度過夜或37度半小時(shí)。
4、封閉液pH:一般5%脫脂牛奶pH大約為6.0-6.5左右,而1%脫脂牛奶可能6.5-7,好像RD公司的WB-Protocol中要求封閉液和稀釋抗體的封閉液需要調(diào)pH至7.4;但是大多數(shù)抗體不調(diào)pH也可以做出來。
5、個(gè)人經(jīng)驗(yàn):5%脫脂牛奶封閉效果佳,但有時(shí)也可能封閉過度,可以與BSA或無蛋白封閉液輪流更換。